suitable for release of physiologically active rat hepatocytes, Type IV, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid, ≥125 CDU/mg solid
NA.54
Clostridium histolyticum
cell culture | mammalian: suitable;single cell analysis: suitable;diagnostic assay manufacturing
TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C
来自组织溶梭菌的胶原酶已被用于: 制备用于消化肿瘤组织的胶原酶溶液作为磷酸盐缓冲生理盐水的补充剂用于消化已切除的肠系膜脂肪组织作为罗斯韦尔公园纪念研究所1640培养基(RPMI-1640)的补充剂用于消化结肠段用于消化子宫内膜组织制备用于消化去被膜的睾丸的酶A和酶B。
组织溶梭菌产生两类胶原酶。梭菌胶原酶比哺乳动物胶原酶更高效。它在胶原三螺旋中的多个裂解位点进行裂解。梭菌胶原酶与气性坏疽中的细菌入侵有关。
溶液通常是在TESCA缓冲液(含有50mM TES、0.36mM氯化钙,37℃时pH 7.4)中按1-2 mg/mL进行制备。 该产品还含有梭菌蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。
一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE。
以原包装形式,该产品在-20°C下可稳定保存6年。在37℃、50℃和-20℃下30天内,FALGPA或蛋白酶活性没有损失。如果分液(10mg/mL)形式快速冷冻并且在-20℃下冷冻保存,粗胶原酶的溶液可保持稳定。进一步的冻融步骤会破坏溶液稳定性。 当在冰上保持时,该产品可在7小时内保持100%活性。