产品描述

本产品是针对 Illumina 高通量测序平台研发的链特异性 RNA 文库构建试剂盒，可对 100 pg ~ 100 ng 的 RNA 样本进行 RNA 文库构建，包含 RNA 片段化、逆转录 ( RT )和 PCR 文库扩增所需的所有组分。本产品通过加热使 RNA 片段化，然后以带接头序列的 3′-N6 Primer 进行反转录，依靠反转录酶的模板转换活性 (Template-switching)，在 RNA 5′ 端添加一段接头序列，产生两端带有接头序列的 cDNA；搭配 AccuNext 双端标签接头引物（CDI, Illumina）（Code. No AG12505、AG12506、AG12507）进行 PCR 扩增即可获得适用于 Illumina 测序平台的测序文库。
本产品操作简单，无需进行传统的末端修复、接头连接等繁琐的步骤，即可获得 RNA 测序文库；优化的反应体系，提高了文库转化效率，能兼容不同的模板量，测序获得的数据均一性高，覆盖度完整；同时，模板转换反应的方向性保留了 RNA 的链方向性，可获得 RNA 链特异性的测序数据。
由于 Total RNA 中 rRNA 占比近 90%，为了测序时获得更多有效的数据量及降低测序成本，建议去除 rRNA 后再进行 RNA 文库构建，以减少测序中 rRNA 的数据占比，获得更多有效的数据。
产品的反应体系经过了精心优化，请使用本产品中提供的试剂进行 RNA 片段化、逆转录和 PCR 文库扩增实验，建议不改变任何反应组分的用量及浓度，或用其他的等效产品替换本产品中组分，以免获得不好的结果。如需替换，请先进行验证。

产品优势

1. 适用于 Illumina 测序平台：整合了 Index 和 Illumina 接头，构建的 RNA 文库可直接进行 NGS 测序。
2. 模板适用范围广：可对 100 pg ~ 100 ng RNA 进行 RNA 文库构建；可兼容真核及原核生物 RNA 样本；降解的 RNA 也可以成功建库，兼容 RIN 值 2 ~ 10 的 RNA 样本。
3. 操作简单：无需进行传统的末端修复、接头连接等繁琐的步骤，即可获得 RNA 测序文库。
4. 能准确识别 RNA 链特异性：Read 1 读取的是原始 RNA 的反义链序列，Read 2 读取的是原始 RNA 的正义链序列；
5. 产品性能稳定：实验操作可重复。